益生菌制品的質(zhì)量控制與審批程序(ppt)

益生菌制品的 質(zhì)量控制與審批程序


中國疾病預(yù)防控制中心
營養(yǎng)與食品安全所



益生菌 Probiotics

PRO-BIOTICS
means For life
益生菌意味著“為了生命”



FAO/WHO益生菌的定義
益生菌是活的微生物，通過攝入足夠數(shù)量，對宿主起有益健康的作用。


FAO/WHO — Probiotics are: “ Live microorganisms which when administered in adequate amounts confer a health benefit on the host ”

益生菌－
益生菌是活的微生物，通過攝入
足夠數(shù)量，對宿主產(chǎn)生一種或多
種特殊且經(jīng)論證的功能性健康益
處。
（歐洲食品與飼料菌種協(xié)會 2002）



PROBIOTICS －
Probiotics are living microorganisms,
which when ingested or locally
applied sufficient numbers, have one
or more specified demonstrated
functional health benefits for the host
(EFFCA 2002)

我國有關(guān)益生菌的定義：益
生菌是指對人和動植物有益
的菌。由益生菌生產(chǎn)的產(chǎn)品
稱為益生菌制品，包括活菌
體、死菌體、菌體成分及代
謝產(chǎn)物。

益生菌的應(yīng)用
食品、功能性食品、膳食補充劑
藥品、飼料、化妝品
益生菌制品作為膳食補充劑
（food supplements）有粉劑、膠囊或片劑

乳酸菌 Lactic acid bacteria
是指能發(fā)酵糖和其它碳水化
合物，產(chǎn)生大量乳酸的細(xì)菌
的通稱。



美國功能性食品市場每年以15 ~ 20%的速度增長, 產(chǎn)值達33 億美元。
日本保健食品銷售額20世紀(jì)90
年代初達4000億日元。 （Berner &O’Donnell, 1998）

美 國 主 要 的 功 能 食
（Berner & O’Donnell, 1998）

添加植物成分或植物提取物
抗氧化、降低心血管疾病的危險、降低癌癥發(fā)生的危險、降低高血壓的危險
添加生物活性肽
提高免疫系統(tǒng)的功能、提高礦物質(zhì)的活性
等



添加膳食纖維
預(yù)防便秘、降低腸癌發(fā)生的危險、降低血中膽固醇
添加ω-3多不飽和脂肪酸降低心臟病發(fā)作的危險、降低某些癌癥發(fā)生的危險、提高免疫系統(tǒng)功能等；


添加益生菌(probiotics) 改善胃腸道功能、提高免疫系統(tǒng)功能、降低腸癌發(fā)生的危險
添加益生原（prebiotics） 改善胃腸道功能、提高免疫系統(tǒng)功能、降低腸癌發(fā)生的危險



常用的益生菌
雙歧桿菌（Bifidobacterium）
乳桿菌（Lactobacillus）

世界上有70多種含雙歧桿菌和乳桿菌的產(chǎn)品，包括酸奶、奶粉和冷凍甜點等。
日本有50多種含有益生菌的不同形式的奶制品
歐洲酸奶




對益生菌菌種的基本要求
1 首先而且最重要的是安全性
必須來自人體或食品
有長期安全使用歷史
2 生產(chǎn)菌種的質(zhì)量控制
3 有實驗證明具有聲稱的功能



中國的益生菌類保健食品
調(diào)節(jié)腸道菌群
增強免疫力

從1997年至2004年一共做了28個產(chǎn)品，16 個含雙歧桿菌、9個含乳桿菌。劑型包括粉劑、膠囊、片劑、口服液。大部分產(chǎn)品聲稱菌數(shù)可達108 ~ 1011 cfu/g(ml)，經(jīng)檢測菌數(shù)可以達到108 cfu/g(ml) ，液體產(chǎn)品也可達到106 cfu/g(ml) 。

常用的益生菌菌種
（Berner & O’Donnel 1998）


菌 種 菌 株
嗜酸乳桿菌 Lactobacillus acidophilus La1等
保加利亞乳桿菌Lactobacillus bulgaricus Lb12
乳乳桿菌 Lactobacillus lactis La1
植物乳桿菌 Lactobacillus platarum 299v, LpO1
鼠李糖乳桿菌Lactobacillus rhamnosus GG, GR-1
羅伊氏乳桿菌 Lactobacillus reuteri SD2112
干酪乳桿菌 Lactobacillus casei Shirota,744
類干酪乳桿菌 Lactobacillus paracasei CRL431
發(fā)酵乳桿菌 Lactobacillus fermentum RC-IRC
瑞士乳桿菌 Lactobacillus helvertiucs BO2


菌 種 菌 株
青春雙歧桿菌 -
Bifidobacterium adolescents
長雙歧桿菌 B. longum B536, SBT-2928
短雙歧桿菌 B. breve Yakult
兩雙歧桿菌 B. bifidus Bb-11
乳雙歧桿菌 B. lactis Bb-02
嬰兒雙歧桿菌 B. infantis Shirota Immunitass
B. Essensis Danone,(Bio Activia)
B. Laterosporus CRL431
枯草芽孢桿菌 Bacillus subtilis -



雙歧桿菌和乳桿菌的安全性問題
認(rèn)為是安全的理由
健康人體的腸道和泌尿-生殖道粘膜中數(shù)量相當(dāng)高
極罕見與疾病有關(guān)



認(rèn)為有安全性問題的理由
除干酪乳桿菌（Lactobacillus cesei Shirota）和嗜酸乳桿菌（ L. acidophilus NCFM）有幾百年的安全使用歷史外，大部分益生菌沒有安全使用歷史。


2001年10月1日-10月4日
FAO/WHO專家委員會在阿根廷科爾多瓦就評價食品中含活的益生菌有關(guān)健康及營養(yǎng)問題召開會議。
會議認(rèn)為有必要建立評價食品用益生菌的系統(tǒng)方法指南，以確定其健康聲稱。




為建立益生菌的評價指南、推薦指標(biāo)和方法
成立FAO/WHO聯(lián)合專家工作組
規(guī)定了確定健康聲稱應(yīng)提供的資料
目的是制定對益生菌的最低要求
主要指食品用益生菌，排除治療用生物制劑和基因修飾的生物

2002年4月30日- 5月1日在加拿大安大略省倫敦市FAO/WHO聯(lián)合專家工作組起草了《食品中益生菌的評價指南
Guidelines for the Evaluation of Probiotic in Food 》



1 確定益生菌的屬/種/株
用表型和基因分型方法進
行株的鑒別
益生菌的有益作用有株的
特異性
按國際菌種保藏法保存菌
株




2 功能學(xué)特征
體外試驗
胃酸耐受試驗、
膽汁耐受性、
粘膜粘附性和／或人上皮細(xì)胞粘附性
對條件致病菌的抗菌活性
降低致病菌表面粘附能力
膽鹽水解酶活性
動物試驗


益生菌的安全性問題
全身感染
有毒代謝活性
易感人群過度的免疫刺激
基因轉(zhuǎn)移



FAO/WHO專家工作組對益生菌進行安全性評價的建議


抗菌素耐藥性類型的測定
某些代謝活性（D-乳酸鹽
的產(chǎn)生、膽鹽非共價鍵結(jié)
合）的評價


對人體副作用的評價
售后消費者不良反應(yīng)的
流行病學(xué)調(diào)查


如待評價的菌株屬于已知對哺乳動物有毒性的產(chǎn)毒菌種，必須測定其產(chǎn)毒能力
待評價的菌株屬于已知具有溶血性，必須測定其溶血活性




我國益生菌產(chǎn)品
安全性評價與質(zhì)量控制

益生菌作為一類生物活性制品，
必須安全、有效、穩(wěn)定，益生菌
類保健食品的生產(chǎn)加工有其自身
的特殊性，如為了使終產(chǎn)品中存
在一定數(shù)量的益生菌活菌體，產(chǎn)
品不能進行消毒滅菌。因此加強
其質(zhì)量管理確保產(chǎn)品質(zhì)量尤為重
要。


菌種安全性要求
生物學(xué)、遺傳學(xué)、功效學(xué)特性明
確和穩(wěn)定。
菌種及其代謝產(chǎn)物必須無毒無害。
來源及國內(nèi)外安全食用資料。
安全性評價資料（包括毒力試驗）。



生產(chǎn)菌種的質(zhì)量控制
建立種子庫
一旦確定某一菌種作為生產(chǎn)用菌種，應(yīng)建
立菌種庫以確保為每次生產(chǎn)提供充足的、
性狀穩(wěn)定的菌種，以避免或減少菌種的污
染及因菌種傳代過多而導(dǎo)致遺傳變異。一
般需要建立三級菌種庫，即原代（原始）
種子庫、主代（主）種子庫和生產(chǎn)（工作）
種子庫。




原代種子庫— 指經(jīng)研究、篩選、鑒定后
確定為食品用益生菌制品生產(chǎn)用菌種，經(jīng)
擴大一代后冷凍干燥一定數(shù)量的單支菌種
作為種子，2～8℃保存，一般定0代。
主代種子庫— 原代種子經(jīng)擴大培養(yǎng)得到
均勻的，冷凍干燥制成一定數(shù)量的單支菌
種，作為制備生產(chǎn)種子庫的菌種，2～8 ℃
保存。主代種子一般采用1～3代。

生產(chǎn)種子庫— 主代種子經(jīng)擴大培養(yǎng)得
到的均勻培養(yǎng)物，冷凍干燥制成一定
數(shù)量的單支菌種， 2～8℃保存，或懸
浮于特定培養(yǎng)液（保護液），分裝安
培置–70 ℃以下保存。每生產(chǎn)一批產(chǎn)品
用一只菌種，用于生產(chǎn)之前要進行部
分項目的檢定，合格后方可使用，生
產(chǎn)種子一般采用3～5代。

《益生菌類保健食品審評
規(guī)定（試行）》
第二條益生菌類保健食品系指能夠促進腸內(nèi)菌群生態(tài)平衡，對人體起有益作用的微生態(tài)產(chǎn)品。


第三條益生菌菌種必須是人體正常菌群的成員，可利用其活菌、死菌及其代謝產(chǎn)物。
益生菌類保健食品必須安全可靠，即食用安全，無不良反應(yīng)；生產(chǎn)用菌種的生物學(xué)、遺傳學(xué)、功效學(xué)特性明確和穩(wěn)定。


第四條 可用于保健食品的益生菌菌種
名單由國家食品藥品監(jiān)督管理局公布。
第五條 國家食品藥品監(jiān)督管理局對保
健食品的益生菌菌種鑒定單位進行認(rèn)定或
認(rèn)可，菌種鑒定單位的名單由國家食品藥
品監(jiān)督管理局公布。
益生菌類保健食品的菌種鑒定工作應(yīng)在
國家食品藥品監(jiān)督管理局認(rèn)定或認(rèn)可的鑒
定單位進行。



第六條 申請益生菌類保健食品，除按
保健食品有關(guān)規(guī)定提交申報資料外，還應(yīng)
提供以下資料：
1、產(chǎn)品配方及配方依據(jù)中應(yīng)包括確定的菌種屬名、種名及菌株號。菌種的屬名、種名應(yīng)有對應(yīng)的拉丁學(xué)名。
舉例：長雙歧桿菌Bifidobacterium. longum B536





10、企業(yè)生產(chǎn)條件符合《保健食品生產(chǎn)良好
規(guī)范》的證明文件。
申請注冊的保健食品，使用《可用于保健食
品的益生菌菌種名單》之外的益生菌菌種的，還
應(yīng)提供菌種具有功效作用的研究報告、相關(guān)文獻
資料和菌種及其代謝產(chǎn)物不產(chǎn)生任何有毒有害作
用的資料。由國家食品藥品監(jiān)督管理局組織相關(guān)
專業(yè)的專家對菌種的食用安全性和功能依據(jù)進行
評價后，在按保健食品的評審程序進行評審。

第七條申請人夠買活菌種凍干粉直接生產(chǎn)保健食品，生產(chǎn)加工工藝只是混合、灌裝過程，本規(guī)定第六條第5項至第10項的資料可由菌種凍干粉原料供應(yīng)商提供復(fù)印件（加蓋原料供應(yīng)商公章）并提供購銷憑證。

經(jīng)過長期保藏的菌種，由于種種原因常易發(fā)生變
異、衰退或死亡。變異是生物基本特性之一，當(dāng)
菌種處在新陳代謝水平最低的生活環(huán)境之中，生
長繁殖受到外界抑制變?yōu)橥顟B(tài)，往往更容易
發(fā)生變異。因此各類菌種在保藏期間必須定期檢
查，采取措施防止衰退、變異或死亡，發(fā)現(xiàn)變異
或衰退時能及時恢復(fù)。

第八條申請注冊的用于益生菌類保健食品生產(chǎn)的菌種應(yīng)滿足以下條件：




第九條試制益生菌類保健食品的場所應(yīng)具備以下條件：
1、建立良好生產(chǎn)規(guī)范（GMP），并逐步建立危害分析關(guān)鍵控制典（HACCP）質(zhì)量保證體系。
2、具備中試生產(chǎn)規(guī)模，即每日至少可生產(chǎn)500L3 的生產(chǎn)能力，并以中試產(chǎn)品報批。


3、必須有專門的廠房或車間、有專用的生產(chǎn)設(shè)備和設(shè)施；必須配備益生菌實驗室，菌種必須有專人管理，應(yīng)由具有中級以上技術(shù)職稱的細(xì)菌專業(yè)的技術(shù)人員負(fù)責(zé)；制訂相應(yīng)的詳細(xì)技術(shù)規(guī)范和技術(shù)保證。

第十條生產(chǎn)用菌種及生產(chǎn)工藝不得變更。
第十一條不提倡以液態(tài)形式生產(chǎn)益生菌類保健食品活菌產(chǎn)品。
第十二條活菌類益生菌保健食品在其保質(zhì)期內(nèi)活菌數(shù)不得少于106 cfu/mL(g)。


第十三條益生菌類保健食品如需在特殊條件下保存，應(yīng)在標(biāo)簽和說明書中標(biāo)示。
第十四條所用益生菌菌種在其發(fā)酵過程中，除培養(yǎng)基外，不得加入具有功效成分的動植物及其它物質(zhì)。


第十五條經(jīng)過基因修飾的菌種不得用于保健食品。
第十六條本規(guī)定由國家食品藥品監(jiān)督管理局負(fù)責(zé)解釋。
第十七條 本規(guī)定自發(fā)布之日起實施。以往發(fā)布的規(guī)定，與本規(guī)定不符的，以本規(guī)定為準(zhǔn)。
可用于保健食品的菌種名單
兩歧雙歧桿菌 Bifidobacterium bifidum
嬰兒雙歧桿菌 B. infantis
長雙歧桿菌 B. longum
短雙歧桿菌 B. breve
青春雙歧桿菌 B. adolescentis

保加利亞乳桿菌 Lactobacillus bulgaricus
嗜酸乳桿菌 L. acidophilus
干酪乳桿菌干酪亞種 L. casei subsp. casei
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
羅伊氏乳桿菌 L. reuteri





益生菌菌種鑒定單位名單
中國疾病預(yù)防控制中心
營養(yǎng)與食品安全所
中國科學(xué)院微生物研究所

不得使用致病菌
不得使用產(chǎn)毒及可能產(chǎn)生其
他活性物質(zhì)的菌種
菌種有安全使用歷史
目前基因修飾的菌種不得用
于生產(chǎn)保健食品。



謝謝大家！

益生菌制品的質(zhì)量控制與審批程序(ppt)